关键词:
低温,人工
心脏停搏
心肺复苏术
再灌注损伤
脑
钙调蛋白激酶Ⅱ
自噬
摘要:
目的评价亚低温对心脏停博复苏猪脑组织钙调蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)与细胞自噬的影响。方法健康雄性白猪21头,体重33~40 kg,采用随机数字表法分为3组:假手术组(S组,n=5)、心脏停博复苏组(CA-CPR组,n=8)和亚低温组(H组,n=8)。CA-CPR组和H组建立心脏停搏复苏模型。右股动、静脉分别置入Swan-Ganz导管监测胸主动脉血压、右房压、体温及采集血标本。右颈外静脉置入诱颤电极至右心室,经电极释放1 mA交流电诱发心室颤动,室颤诱发成功后,停止机械通气8 min,然后开始心肺复苏。心肺复苏2.5 min时,静脉注射肾上腺素20 μg/kg,此后每3 min重复1次。复苏5 min时,予以电除颤,判断自主循环。若自主循环未恢复,立即心肺复苏2 min,然后电除颤1次。复苏成功后继续机械通气30 h。H组复苏成功后5 min时,利用体表控温毯将体温降至33 ℃,维持至复苏后24 h,后以1 ℃/h复温5 h;其余2组用体表控温毯维持体温37.5~38.5 ℃。于复苏后1、6、12、24和30 h(T1-5)时经股静脉采集血样,采用ELISA法检测血清NSE和S100β蛋白的浓度;随后随机处死5头猪,取大脑皮层组织,采用Western blot法检测CaMKⅡ、微管相关蛋白1轻链3 Ⅱ(LC3Ⅱ)和p62的表达水平。于复苏后48、72和96 h时(T6-8),CA-CPR组和H组余下3头猪进行神经功能缺损评分。结果与S组比较,CA-CPR组和H组T1-5时血清NSE和S100β蛋白浓度升高,脑组织CaMKⅡ和LC3Ⅱ表达上调、p62表达下调(P<0.05);与CA-CPR组比较,H组T3-5时血清NSE和S100β蛋白浓度降低,T6-8时神经功能缺损评分下降,脑组织CaMKⅡ和LC3Ⅱ表达下调、p62表达上调(P<0.05)。结论亚低温减轻猪心脏停搏复苏后脑损伤的机制可能与抑制CaMKⅡ激活和减轻自噬水平有关。