关键词:
丁酸钠
心脏骤停
心肺复苏
心肌损伤
脑损伤
自噬
细胞凋亡
摘要:
目的:探讨丁酸钠对猪心肺复苏后心脑损伤的保护效果及作用机制。方法:采用随机数字法将24头健康国产雄性大白猪分为假手术组(n=6)、心肺复苏组(n=10)和丁酸钠组(n=8)。假手术组只行气管插管和动静脉置管,不进行诱导心室颤动及心肺复苏。心肺复苏组和丁酸钠组动物采用电刺激法诱导心室颤动9 min、心肺复苏6 min的方法制备猪心脏骤停-心肺复苏模型。于复苏成功后5 min时,丁酸钠组经股静脉泵入丁酸钠75 mg/kg维持1 h。假手术组和心肺复苏组采用同样方法给予等量等渗NaCl溶液。于心脏骤停前和复苏后1、2、4和24 h时采集静脉血样,应用酶联免疫吸附测定法检测血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)和S100钙结合蛋白B(S100B)表达水平。于复苏后24 h时,应用蛋白印迹法检测动物心肌及大脑皮层组织微管相关蛋白1轻链3(LC3)、泛素结合蛋白62(p62)蛋白表达水平,并采用TUNEL法检测细胞凋亡率。结果:心肺复苏组有9头猪复苏成功,其中7头存活至24 h;丁酸钠组有7头猪复苏成功,且均存活至24 h。3组动物24 h复苏成功情况比较,差异无统计学意义(χ^(2)=3.381,P=0.184)。复苏后1、2、4、24 h,3组动物血清cTnI(F=62.736、201.265、330.083、643.538,P均<0.001)、CK-MB(F=90.380、181.548、669.657、707.485,P均<0.001)、NSE(F=92.302、125.730、590.627、1130.372,P均<0.001)和S100B(F=42.831、152.004、295.517、1023.409,P均<0.001)水平比较,差异均有统计学意义。与假手术组相比,心肺复苏组与丁酸钠组动物复苏后出现心脑损伤,表现为复苏后2、4、24 h血清cTnI、CK-MB、NSE和S100B水平均显著升高,且心肺复苏组更高(P均<0.05)。复苏后24 h时,3组动物心肌细胞及大脑皮层细胞自噬标记物LC3(F=81.671、49.204,P均<0.001)、p62(F=127.620、65.594,P均<0.001)水平及凋亡率(F=116.750、249.105,P均<0.001)比较,差异均有统计学意义。与假手术组相比,心肺复苏组与丁酸钠组动物复苏后24 h心肌组织及大脑皮层组织LC3表达均增加、p62表达均减少、细胞凋亡指数均显著升高(P均<0.05)。但与心肺复苏组相比,丁酸钠组复苏后24 h心肌组织及大脑皮层组织LC3表达均减少、p62表达均增加、细胞凋亡指数均显著降低(P均<0.05)。结论:丁酸钠对心脏骤停复苏后心脑损伤具有保护作用,机制可能与抑制细胞自噬及凋亡有关。