关键词:
光滑念珠菌
亚抑菌浓度
氟康唑
天冬氨酰蛋白酶
生物膜
摘要:
目的探究亚抑菌浓度(sub-MIC)氟康唑对光滑念珠菌分泌的天冬氨酰蛋白酶(Sap)活性和生物膜形成的影响,为临床诊疗提供理论依据。方法收集青海省人民医院2021年4月-2022年10月临床分离的光滑念珠菌,采用半自动细菌分析系统法测定氟康唑对光滑念珠菌的最低抑菌浓度(MIC)。采用牛血清蛋白琼脂培养基检测sub-MIC氟康唑对光滑念珠菌Sap活性的影响;结晶紫法检测sub-MIC氟康唑对光滑念珠菌生物膜形成的影响;实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测在不同sub-MIC氟康唑作用下光滑念珠菌Sap和生物膜形成相关基因转录水平,分为对照组(不含氟康唑)、1/2MIC氟康唑组、1/4MIC氟康唑组、1/8MIC氟康唑组和1/16MIC氟康唑组。结果氟康唑对9株临床分离的光滑念珠菌MIC为8~32 mg/L。与对照组相比,1/2MIC氟康唑组光滑念珠菌Sap活性明显升高,差异有统计学意义(F=5.917,P<0.05),而1/4MIC、1/8MIC和1/16MIC氟康唑各组Sap活性差异均无统计学意义(P均>0.05);1/2MIC和1/4MIC氟康唑可明显刺激YPS3、YPS5和YPS8基因转录(F=4.271、7.551、2.945,P均<0.05),1/8MIC和1/16MIC氟康唑对Sap相关基因转录无明显干预作用(P>0.05)。与对照组相比,不同sub-MIC氟康唑对光滑念珠菌生物膜形成无明显干预作用,差异无统计学意义(P>0.05),各组SNF2、SNF6、EFG1、TEC1和YAK1基因转录水平差异均无统计学意义(P均>0.05);与对照组相比,1/2MIC氟康唑可下调CST6基因转录,差异有统计学意义(F=4.002,P<0.05),1/4MIC、1/8MIC和1/16MIC氟康唑组CST6基因转录差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论1/2MIC氟康唑可能上调YPS3、YPS5和YPS8基因转录水平,从而促进光滑念珠菌分泌Sap。sub-MIC氟康唑对光滑念珠菌生物膜形成无明显作用。