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关键词： 艰难梭菌   CysE   CysK   克隆表达   生信分析  

摘要： 目的生物信息学分析艰难梭菌半胱氨酸合成蛋白CysE和CysK的理化性质、三维结构和蛋白互作信息,并进行两个蛋白的体外克隆表达和纯化。方法采用ProtParam对CysE和CysK蛋白进行理化性质预测,TMHMM进行跨膜结构域分析,SignalP分析蛋白信号肽,SWISS-MODEL预测二者的三维结构,STRING分析蛋白互作信息。将cysE和cysK目的基因片段分别克隆到pET-32a和pET-28a载体,融合His标签通过大肠埃希菌表达系统来表达目的蛋白,并进行表达纯化测试。结果CysE蛋白共有196氨基酸(AA),无跨膜区,信号肽序列为无,疏水性一般,有2个无序性片段。CysK蛋白共有302 AA,无跨膜区,信号肽序列为无,疏水性一般,有5个无序性片段。两个蛋白共产生α螺旋、β片层、β转角和无规卷曲4种二级结构。CysE的二级结构共由5个α螺旋、15个β片层、10个β转角和19个无规卷曲组成;CysK的二级结构共由15个α螺旋、16个β片层、16个β转角和26个无规卷曲组成。蛋白互作预测结果显示,CysE与CysK涉及菌株的蛋白合成和代谢途径,主要是半胱氨酸的合成途径、甲硫氨酸的合成以及硫代谢途径等。重组表达载体pET-32a-cysE和pET-28a-cysK构建成功,对蛋白诱导表达条件进行优化后,进行SDS-PAGE电泳。结果显示,两个蛋白的分子量分别为CysE 38 ku和CysK 34 ku,二者的纯度大于85%。最终得到的CysE重组蛋白浓度为0.8 mg/mL,CysK重组蛋白的浓度为1 mg/mL。结论本研究对艰难梭菌CysE和CysK的蛋白进行了生物信息学分析,并成功构建和表达了CysE与CysK重组蛋白,为进一步探索二者对于艰难梭菌致病性的相关机制提供了基础。

关键词： elovl4b   LC-PUFAs   生物合成   肝脏转录组测序   斑马鱼  

摘要： 为探究脂肪酸延长酶4b(elovl4b)基因在淡水鱼长链多不饱和脂肪酸(LC-PUFAs)合成中的作用机制,研究首先使用CRISPR/Cas9(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated systems)系统成功构建elovl4b基因第2外显子上缺失2个碱基的基因突变纯合子模型(elovl4b^(-/-)),并分析elovl4b基因敲除后斑马鱼肝脏的脂肪酸组成变化。分析发现,相比于野生型(WT)斑马鱼,elovl4b^(-/-)斑马鱼肝脏总脂肪酸占比、C22PUFA占比显著上升,多种LC-PUFAs组成占比出现显著变化。进一步进行斑马鱼肝脏的转录组测序,创建基因文库,筛选出差异表达基因进行富集分析和数据库功能注释分析,用qPCR技术对KEGG通路中的差异表达基因(P<0.05)进行验证。结果显示,基因表达谱变化显著,共有809个基因表达出现显著性差异(485个下调,324个上调),包括磷酸戊糖途径在内的多条通路显著富集。脂肪酸合成等通路显著上调,花生四烯酸代谢、初级胆汁酸合成等通路显著下调。随机选取12条基因通过qPCR(Real-time Quantitative PCR)进行验证,基因的表达趋势与转录组测序所得结果基本一致。上述结果说明elovl4b缺失后,机体内各类LC-PUFAs的组成及包括花生四烯酸代谢、脂肪酸代谢、脂肪生成和代谢在内的许多重要的机体生命过程发生了相应性的变化,进一步揭示了elovl4b在LC-PUFAs合成过程中的作用,能为相关的心血管、慢性肥胖等疾病的治疗提供理论依据。

关键词： 动物微生物   课程思政   岗课赛证思   知识传授   能力培养   价值引领  

摘要： [目的]为在《动物微生物》课堂更加有效地开展课程思政,实现价值塑造、能力培养和知识传授的高度融合。[方法]《动物微生物》课程根据行业需求、学院办学宗旨、课程特点及《高等学校课程思政建设指导纲要》的要求,制定课程思政目标;组建由校内老、中、青专任教师、企业实践指导教师、行业专家及思政课教师组成的课程思政教学团队;开展“岗课赛证思”四融五体教学模式,进行全员、全方位、全过程思政育人;实施以学生为主体、教师为主导、思政融入的线上线下混合式教学,课后进行多元化教学效果评价。[结果]《动物微生物》课程思政教学改革在实践过程中形成了显著成果,毕业生就业率达到99%,教学团队原创开发了“岗课赛证思”在线精品课程数字资源;学生近3年在全国技能大赛、“青创北京”“挑战杯”首都大学生创新创业计划大赛、中国国际“互联网+”大学生创新创业大赛中多次获奖。[结论]《动物微生物》课程思政实现了知识传授、能力培养和价值引领的高度融合,提升了育人效果,提高了人才培养质量。

关键词： 青年人   腹压   膈肌功能   压力生物反馈   最大吸气压力  

摘要： 背景:躯干压力生物反馈被认为是评估核心肌肉力量的一个可靠指标,其不仅能反映个体躯干力量状况,而且与呼吸肌功能有着密切关系。目的:探讨青年人躯干压力生物反馈与膈肌功能之间的相关性。方法:选择上饶师范学院80名大学生为研究对象,男34名,女46名,年龄(19.83±1.45)岁,采用床旁肌骨超声系统测量受试者膈肌厚度和移动度,便携式肺功能检测仪检测受试者最大吸气压,压力生物反馈仪测试受试者俯卧与仰卧位的腰部及腹部压力。采用Pearson或Spearman相关系数确定躯干压力生物反馈与膈肌功能之间的相关程度,多元线性回归分析确定膈肌功能的预测模型。结果与结论:①以性别分组,男子组年龄、身高、体质量、躯干压力生物反馈数值、平静吸气末膈肌厚度、平静呼气末膈肌厚度、平静呼吸膈肌增厚率、深吸气末膈肌厚度、深呼气末膈肌厚度、深吸气膈肌移动度、最大吸气压均大于女子组(P均<0.05);②以体力活动水平分组,久坐组躯干压力生物反馈数值及最大吸气压均低于运动组(P均<0.05);③相关性分析显示,躯干压力生物反馈(俯卧)、躯干压力生物反馈(仰卧)与平静吸气末膈肌厚度、平静呼气末膈肌厚度、平静呼吸膈肌增厚率、深吸气末膈肌厚度、深呼气末膈肌厚度、深呼吸膈肌增厚率、深吸气膈肌移动度、最大吸气压均具有显著性相关关系(P均<0.01);④多元线性回归分析显示,躯干压力生物反馈(俯卧)进入平静吸气末膈肌厚度的预测模型(F=27.228,P<0.001),躯干压力生物反馈(俯卧)进入深吸气末膈肌厚度的预测模型(F=38.615,P<0.001),躯干压力生物反馈(仰卧)、年龄进入深吸气膈肌移动度的预测模型(F=15.408,P<0.001),躯干压力生物反馈(俯卧)、体质量、年龄进入最大吸气压的预测模型(F=22.314,P<0.001);⑤结果显示,躯干压力生物反馈与膈肌厚度、膈肌移动度和最大吸气压的相关性较强,快速简便的躯干压力生物反馈测量可以作为筛查健康青年人膈肌功能的一种方法。

关键词： Ⅰ型糖尿病   伤口愈合   成纤维细胞   生物力学  

摘要： 目的探究由链脲佐菌素(streptozocin,STZ)诱导的Ⅰ型糖尿病(typeⅠdiabetes mellitus,T1DM)小鼠,其背部皮肤生物力学性能减弱和伤口愈合障碍的机制。方法40只8周龄且体质量为20~25 g的雄性C57BL/6小鼠,采用随机数字表法分为2组:野生型(wild type,WT)组(n=20)和T1DM组(n=20)。利用原子力显微镜和扫描电镜检测皮肤的杨氏模量、松弛率及胶原排布。将皮肤组织石蜡切片进行苏木精-伊红(HE)染色、马松染色、天狼星红染色、Gordon Sweet染色和维多利亚蓝染色,分别评估表皮与肉芽组织、总胶原含量、Ⅲ型胶原与Ⅰ型胶原比例、网状纤维含量和弹性纤维含量。免疫组织化学染色法和蛋白免疫印迹法定量检测Ⅰ型胶原与Ⅲ型胶原蛋白表达情况。流式细胞术和组织石蜡切片的免疫荧光染色检测创面组织内肌成纤维细胞转化情况。结果与WT组相比,在造创后第21天T1DM组小鼠背部皮肤刚度、强度和回弹力均显著降低(P<0.05);愈合过程中及愈合后T1DM组胶原蛋白、弹性纤维减少,Ⅲ型胶原蛋白与Ⅰ型胶原蛋白比例显著增加,网状纤维明显增多(P<0.05);T1DM组创面愈合早期阶段肌成纤维细胞转化显著减少(P<0.05)。结论T1DM抑制成纤维细胞向肌成纤维细胞转化,引起伤口愈合障碍,导致小鼠背部皮肤力学性能减弱。

关键词： 生物炭   腐植酸   唐菖蒲   土壤  

摘要： 为探究生物炭和腐植酸对唐菖蒲(Gladiolus hybridus)生长及根际土壤环境的影响,以唐菖蒲为试验材料,采用设施大棚栽培方式,设置8个处理:对照处理(CK:不加任何生物炭和腐植酸);单施腐植酸处理(T1:0.2 kg·m^(-2));单施生物炭处理(T2:1.5 kg·m^(-2));2种生物材料配施处理(T3:0.5 kg·m^(-2)生物炭+0.2 kg·m^(-2)腐植酸;T4:1.0 kg·m^(-2)生物炭+0.2 kg·m^(-2)腐植酸;T5:1.5 kg·m^(-2)生物炭+0.2 kg·m^(-2)腐植酸;T6:2.0 kg·m^(-2)生物炭+0.2 kg·m^(-2)腐植酸;T7:3.0 kg·m^(-2)生物炭+0.2 kg·m^(-2)腐植酸),测定不同处理下的植株生长和土壤指标。结果表明,生物炭添加腐植酸处理整体增加了唐菖蒲的生物量,与CK相比,单施生物炭处理(T2)与组合配施处理(T4、T5、T6、T7)在定植60和90 d时的唐菖蒲鲜重和干重有所增加。此外,通过检测唐菖蒲叶片中叶绿素含量的相对值发现,随着生物炭施用量的增加,叶绿素相对值(SPAD)也相对增加。而在定植60 d时,通过根系扫描系统(WinRHIZO)分析根系长度、表面积、体积等指标发现,各处理均在一定程度上促进了唐菖蒲根系生长,其中T2、T3、T4、T5、T6、T7各指标均显著高于CK。从土壤理化性状变化看,各处理的有机质含量整体较CK显著提高。与CK相比,除T1处理唐菖蒲根际土壤的pH值降低外,其余处理pH值均有所提高,以T2、T6、T7处理增幅较大,分别增加了0.88、0.87和1.07个单位。同时,与CK相比,T2、T5、T6、T7处理的土壤紧实度分别显著降低15.56%、20.95%、19.45%和24.97%。综上,生物炭和腐植酸在培肥土壤和促进植物生长方面具有潜在的应用价值,在本试验条件下,T5和T6处理的生物炭和腐植酸配施对唐菖蒲生长具有较好的促进作用。本研究为唐菖蒲高效栽培提供了技术参考。

关键词： 黄酮类化合物   天然产物   生物合成   合成生物学   化妆品  

摘要： 黄酮类化合物是一类广泛存在于自然界中的多酚类化合物，因其显著的抗氧化、抗炎、抗菌等生物活性在化妆品中广泛应用。然而，传统植物提取方法的局限性促使研究人员转向合成生物学以寻求更高效的生产途径。本文根据美白抗氧化、抗菌消炎、防晒抗衰老和增色增彩四个功能分类分别列举了几种常见黄酮类化合物在化妆品中的应用；介绍了黄酮类化合物的现有生物合成途径并总结了典型黄酮类化合物的最新研究进展；详细讨论了合成生物学及代谢工程策略。接着，针对黄酮类化合物在化妆品应用中的水溶性差和稳定性低的问题，总结了相应解决方案的研究进程。最后，我们总结并展望了人工智能辅助合成生物学的策略以应对黄酮类化合物合成过程中的挑战。同时，我们强调了黄酮类化合物的安全性和有效性评估的重要性，以推动其在化妆品行业的应用。

关键词： 矿质营养元素   主要油料作物   化肥用量   花生生产   生物菌肥   花生产量   土壤酸化   生态效益  

摘要： 花生是镇平县的主要油料作物。目前,花生生产为追求高产量,出现化肥用量不断增加的趋势,且重施化肥,轻施有机肥、生物菌肥,导致花生产量增加不明显、种植花生成本增加、花生营养元素不协调、品质下降,并出现土壤酸化、板结、病害多发等一系列问题。为改变这种状况,近年,镇平县科技人员指导农资经销主体除引进含有氮磷钾矿质营养元素外,同时还将含有机质、生物菌的养稼复合微生物肥料在花生上进行试验、示范和推广,取得较好经济效益和生态效益。

关键词： 篮球运动   侧切模式   人体下肢   生物力学特征  

摘要： 篮球运动中存在大量的侧切动作,侧切动作的不同模式会对运动员的下肢各关节形成不同的影响。本文以10位达到国家二级运动员水平的男性篮球运动员为研究对象,分析了后足落地、中足落地、前足落地3种不同侧切状态下篮球运动员下肢(膝关节)的生物力学特征。结果表明,采用后足落地侧切形式时,人体下肢膝关节峰值屈曲角度、活动度、反作用力峰值均更高,此时人体下肢更容易出现运动损伤;采用前足落地侧切形式时,更不容易出现运动损伤,且侧切变向、蹬伸效果更好。

关键词： 支架内再狭窄   炎性因子   清蛋白   S100钙结合蛋白A12   免疫球蛋白E   综述  

摘要： 综述炎性因子、白蛋白、S100钙结合蛋白A12、免疫球蛋白E在支架内再狭窄中的预测价值,以期更好地了解血清生物学指标与支架内再狭窄的相关性,为支架内再狭窄的发现及临床上支架内再狭窄的精准干预治疗起到积极的推动作用。