检索结果-重庆医科大学图书馆

作者：杜璐第三军医大学

学位级别：硕士

疼痛的研究目前成为临床的热点,针对疼痛的发生、传导等机制的研究可以为临床治疗提供新的思路。疼痛发生、传导过程涉及到众多的神经纤维、神经元及胶质细胞等,通过不同的受体及通道传递疼痛的信号。P2X3受体选择性的分布在伤害性感受... 详细信息

疼痛的研究目前成为临床的热点,针对疼痛的发生、传导等机制的研究可以为临床治疗提供新的思路。疼痛发生、传导过程涉及到众多的神经纤维、神经元及胶质细胞等,通过不同的受体及通道传递疼痛的信号。P2X3受体选择性的分布在伤害性感受器细胞,在疼痛的发生、传导中发挥重要作用。通过P2X3受体的激动剂、特异性的抑制剂和RNAi技术抑制P2X3受体表达的研究发现,P2X3受体在不同的疼痛模型,如炎性痛和神经病理性痛等不同类型的疼痛中发挥重要作用。但是这些实验均以成年动物为模型,很少涉及到幼年动物模型,而儿童的疼痛也比较常见,且神经系统在发育过程中可塑性较强,发育过程中的刺激可能会引起神经系统结构和功能改变,因此本实验采用大鼠生后发育过程中的角叉菜胶致炎性痛和坐骨神经慢性压迫性损伤(Chronic constriction injury, CCI)术后神经病理性痛模型研究P2X3受体在疼痛中的作用。方法: 1.通过大鼠足底皮下注射角叉菜胶致炎建立急性炎性痛模型;通过大鼠坐骨神经CCI术建立神经病理性痛模型。 2.通过观察模型大鼠的行为学变化,并测定动物的热痛阈(Thermal withdrawl latency,TWL)和机械性痛阈(Paw withdrawl threshold,PWT)研究疼痛的发生、发展过程。 3.通过免疫组织化学技术动态监测炎性痛和神经病理性痛模型大鼠的背根神经节(Dorsal root ganglion, DRG)和脊髓背角的P2X3受体的表达变化特点,并进行半定量分析。结果: 第一部分: 1.成功建立了大鼠不同发育阶段角叉菜胶致炎性痛模型,足底皮下注射角叉菜胶后出现舔足、缩足等痛觉相关行为。 2.发育过程中正常大鼠的痛阈逐渐升高。新生大鼠与成年大鼠足底皮下注射交叉菜胶后的痛阈变化趋势相似,均出现热痛敏和机械性痛敏现象,痛阈先降低,注射后6-12h达最低点,再逐渐恢复,注射后7d大多数恢复至正常水平。3.大鼠正常发育过程DRG中P2X3受体表达逐渐下调。新生7天、14天和21天的幼年大鼠足底皮下注射角叉菜胶后,P2X3受体在DRG中的表达下调,而且下降速度快于正常发育过程中的下降速度。成年大鼠足底皮下注射角叉菜胶致炎后DRG中P2X3受体表达逐渐升高,注射后1d达到最高,而后逐渐下降,注射后7d接近正常水平。新生7天的大鼠脊髓背角P2X3受体在炎性痛过程中变化不明显;而成年大鼠足底皮下注射角叉菜胶致炎后脊髓背角中P2X3受体表达逐渐升高,注射后1d达到最高,而后逐渐下降,注射后7d接近正常水平。第二部分: 1.成功建立了大鼠不同发育阶段坐骨神经CCI术后致神经病理性痛的模型,动物出现典型的神经病理性痛觉相关行为。 2.发育过程中正常大鼠的痛阈逐渐升高。新生大鼠与成年大鼠CCI术后的痛阈变化趋势相似,均出现痛敏现象,热痛阈和机械性痛阈先降低,术后14d达到最低,再逐渐恢复,至术后28d接近正常水平。 3.大鼠正常发育过程中DRG中P2X3受体表达逐渐下调。新生7天、14天和21天组的大鼠坐骨神经CCI术后能引起术侧的P2X3受体在DRG中的表达下调,且速度快于正常发育过程中的下降速度。成年组大鼠坐骨神经CCI后大鼠DRG中P2X3受体表达逐渐升高,术后14d达到最高,而后逐渐下降,术后28d接近正常水平。新生7天的大鼠脊髓背角P2X3受体表达变化不明显;而成年组大鼠坐骨神经CCI后大鼠脊髓背角中P2X3受体表达逐渐升高,术后14d达到最高,而后逐渐下降,术后28d接近正常水平。结论: 1.新生大鼠的神经系统生后正常发育成熟过程中痛阈逐渐升高。皮下注射角叉菜胶后能引起新生和成年大鼠的急性炎性痛,动物均出现痛阈迅速下降再逐渐恢复至正常的趋势;坐骨神经CCI术后能引起新生和成年大鼠的神经病理性痛,动物均出现痛阈下降再缓慢恢复至正常的趋势。与神经病理性痛相比较,炎性痛发病快,持续时间短,恢复快。 2.P2X3受体在大鼠生后神经系统的发育成熟中发挥重要作用,而且新生大鼠的神经系统具有易损性,新生大鼠受到炎性痛和神经病理性痛刺激后,DRG中P2X3受体表达下降。 4.P2X3受体在成年大鼠的炎性痛和神经病理性痛过程中发挥重要作用,成年大鼠受到炎性痛和神经病理性痛刺激后,DRG和脊髓背角P2X3受体的表达增加。综上所述,P2X3受体在神经系统的发育成熟中发挥作用,并且在炎性痛和神经病理性痛过程中发挥重要作用。但是疼痛涉及的细胞、受体及通道比较广泛,为了阐明痛觉发生机制,还有待进一步深入研究。

关键词： P2X3受体背根神经节脊髓背角角叉菜胶坐骨神经慢性压迫性损伤炎性痛神经病理性痛

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大鼠脊髓背角Ⅱ层脑啡肽能神经元形成的局部环路

大鼠脊髓背角Ⅱ层脑啡肽能神经元形成的局部环路

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中国神经科学学会第四次会员代表大会暨第八届全国学术会议

作者：李云庆马江波吕伯昌李军平寇珍珍第四军医大学人体解剖与组织胚胎学教研室暨梁銶琚脑研究中心宁夏医学院人体解剖学教研室

目的观察脊髓背角Ⅱ层内脑啡肽（ENK）能神经元形成的局部环路,探讨这些环路在痛信息传递与调制中的作用。方法在前原脑啡肽-绿色荧光蛋白（PPE-GFP）转基因小鼠用荧光素逆行追踪与免疫荧光组化染色相结合的多重标记技术进行研究。结果 ... 详细信息

目的观察脊髓背角Ⅱ层内脑啡肽（ENK）能神经元形成的局部环路,探讨这些环路在痛信息传递与调制中的作用。方法在前原脑啡肽-绿色荧光蛋白（PPE-GFP）转基因小鼠用荧光素逆行追踪与免疫荧光组化染色相结合的多重标记技术进行研究。结果（1）将荧光金（FG）定位注射到PPE-GFP转基因小鼠的臂旁核,可在颈髓和腰髓背角浅层（Ⅰ、Ⅱ层）观察到FG逆标的投射神经元;（2）脊髓全长的背角Ⅱ层内有散在的PPE-GFP阳性神经元胞体和比较密集的PPE-GFP阳性纤维和终末;（3）PPE-GFP阳性神经元胞体周围有IB4标记的初级传入终末和来自脑干的5-HT能下行投射纤维终末与之形成紧密接触;（4）FG逆标神经元的胞体周围有PPE-GFP阳性终末和IB4标志终末与之形成紧密接触;（5）FG逆标神经元胞体周围有PPE-GFP阳性终末和5-HT阳性终末与之形成紧密接触。结论脊髓背角Ⅱ层的ENK能中间神经元发出的轴突终末与来自下行抑制系统的5-HT能终末和初级传入终末的IB4标记终末与背角Ⅰ层的投射神经元存在密切的联系,这些联系所构成的局部环路在伤害性信息向中枢的传递和调控过程中可能发挥重要的作用。

关键词：脊髓背角脑啡肽局部环路镇痛

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小胶质细胞P2X7受体在神经病理性疼痛中作用及机制的初步研究

小胶质细胞P2X7受体在神经病理性疼痛中作用及机制的初步研究

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作者：何文娟第三军医大学

学位级别：博士

神经病理性疼痛是临床顽症之一,长期困扰患者并严重影响其生活质量。脊髓背角是机体对伤害性信息进行自身调制或整合的重要位点。它不仅是神经活性物质和受体分布最多和含量最丰富的部位,也是痛、触、温觉神经元主要分布的区域之一。研... 详细信息

神经病理性疼痛是临床顽症之一,长期困扰患者并严重影响其生活质量。脊髓背角是机体对伤害性信息进行自身调制或整合的重要位点。它不仅是神经活性物质和受体分布最多和含量最丰富的部位,也是痛、触、温觉神经元主要分布的区域之一。研究脊髓背角部位疼痛相关的调控因子有助于了解神经病理性疼痛发生和维持的机制。以往大量研究表明脊髓小胶质细胞的激活是神经病理性疼痛产生和持续的关键因素,但目前对于其活化的分子和细胞机理尚需深入探讨。三磷酸腺苷(Adenosine triphosphate, ATP)是参与脊髓水平伤害性信息调制的一种重要的递质。ATP通过P2嘌呤受体在中枢神经系统中发挥其重要作用,其中包括7种离子通道型P2X受体和9种G-蛋白偶联P2Y受体。P2X受体是P2X家族中一个独特的亚型,研究表明其可能参与了痛觉信息的调制和传导。P2X受体在中枢神经系统分布广泛,包括小胶质细胞在内的多种神经细胞上均有其功能性受体的表达。外周神经损伤后,损伤组织细胞和感觉神经末梢释放大量ATP,研究表明ATP可以激活小胶质细胞,诱导小胶质细胞聚集、增生,并促进其释放多种前炎症因子和神经活性物质。但是P2X受体是否介导脊髓背角部位小胶质细胞的激活,参与神经病理性疼痛的发生和持续过程目前尚不清楚。本项目拟采用体外培养的小胶质细胞和坐骨神经慢性压迫损伤(chronic constriction of the sciatic nerve injury,CCI)大鼠模型为研究对象,结合在体及离体实验,综合应用形态学、分子生物学和行为学等多种技术方法,观察P2X受体激活对小胶质细胞的细胞内游离Ca)浓度(the intracellular concentration of Ca) ,[Ca)]i)和D-丝氨酸(D-Serine,D-Ser)等氨基酸的释放的影响,初步探讨P2X受体激活与小胶质细胞活化的关系及其调控机制;观察CCI模型中脊髓背角部位小胶质细胞激活与P2X受体表达变化的规律及关系,证实P2X受体介导小胶质细胞活化参与神经病理性疼痛。该研究对阐明神经病理性疼痛的机制具有重要意义。方法: 体外培养BV-2小胶质细胞,免疫荧光标记技术观察BV-2小胶质细胞CD11b、P2X受体和丝氨酸消旋酶(Serine racemase,SR)的表达;免疫组织化学染色观察ATP、BzATP作用后BV-2小胶质细胞CD11b、SR表达的变化;激光共聚焦扫描显微镜(Confocal laser scanning microscopy,CLSM)观察ATP、BzATP作用下BV-小胶质细胞[Ca]i变化;应用高效液相色谱技术(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)观察ATP、BzATP作用下BV-2小胶质细胞D-Ser等氨基酸类递质的释放;制备坐骨神经慢性压迫损伤模型(,免疫组织化学染色和免疫印迹技术(Western blotting)观察脊髓背角P2X受体表达变化;免疫荧光双重标记技术对脊髓P2X受体表达进行细胞定位;制备鞘内插管后的CCI大鼠模型,鞘内给予P2X受体特异性拮抗剂亮蓝G(Brilliant blue G,BBG)后,免疫组织化学染色观察脊髓背角小胶质细胞活化和OX42表达变化;热辐射法和Von Frey(vFh)纤维丝测痛检测大鼠热痛阈和机械性痛阈的变化。结果: 第一部分: 1.培养的BV-2小胶质细胞,免疫荧光标记鉴定其CD11b阳性率>99%,符合实验要求。免疫荧光双重标记表明小胶质细胞表达P2X受体蛋白,其阳性呈细小颗粒状,主要分布于小胶质细胞的胞膜和胞浆内。 2.0.1μmol/L和1μmol/L的ATP并不能引起小胶质细胞[Ca]i升高,10μmol/L ATP才可引起小胶质细胞[Ca]i升高,而1μmol/L的BzATP即可引起小胶质细胞[Ca]i升高,而且随着浓度的升高ATP和BzATP诱发的[Ca]i更为明显,存在一定的剂量依赖关系。100μmol/L ATP、BzATP均则可引起小胶质细胞[Ca]i显著的升高;而且BzATP诱发的[Ca]i浓度升高要比ATP诱发的[Ca]i浓度升高更为持久。 3.100μmol/L ATP、BzATP作用于小胶质细胞可促进其[Ca]i升高,而在预孵育P2X特异性阻断剂BBG(100nmol/L) 20min后ATP、BzATP诱发的小胶质细胞[Ca]i反应完全被抑制。 4.将细胞培养液更换为无钙液预孵育20min后,100μmol/L BzATP诱发小胶质细胞[Ca]i升高被抑制。 5.100μmol/L ATP、BzATP作用于小胶质细胞24h后可以促进其活化标记物CD11b表达明显升高,而预孵育BBG可以抑制这一表达上调效应。第二部分: 1.100μmo

关键词：脊髓背角小胶质细胞 P2X7受体甘氨酸 D-丝氨酸

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椎管内非阿片类药物镇痛研究进展

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国外医学（麻醉学与复苏分册） 2005年第3期26卷 167-170页

作者：秦晓辉米卫东张宏解放军总医院麻醉科北京市100853

随着人们对脊髓,特别是脊髓背角结构功能的认识和疼痛机制研究的深入,脊髓水平用药改变机体对痛觉的感知已引起科学家的广泛兴趣。不仅椎管内注入阿片类药物能够改变伤害性感受的传入,一些作用于其它分子靶标的药物应用于椎管内也能产... 详细信息

随着人们对脊髓,特别是脊髓背角结构功能的认识和疼痛机制研究的深入,脊髓水平用药改变机体对痛觉的感知已引起科学家的广泛兴趣。不仅椎管内注入阿片类药物能够改变伤害性感受的传入,一些作用于其它分子靶标的药物应用于椎管内也能产生镇痛作用或增强阿片类药物镇痛并抑制其所致的耐受和依赖。现就椎管内非阿片类药物镇痛研究进展进行综述。

关键词：药物镇痛非阿片类椎管内伤害性感受阿片类药物机制研究结构功能脊髓背角脊髓水平镇痛作用药物应用分子靶标科学家

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新生大鼠脊髓背角网络突触传递的特性:抑制性氨基酸及其离子型受体的作用

新生大鼠脊髓背角网络突触传递的特性:抑制性氨基酸及其离子型受...

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中国神经科学学会第六届学术会议暨学会成立十周年庆祝大会

作者：常莹罗层李震吕卓敏刘丹娜陈军第四军医大学疼痛生物医学研究所第四军医大学疼痛生物医学研究所第四军医大学疼痛生物医学研究所第四军医大学疼痛生物医学研究所第四军医大学疼痛生物医学研究所第四军医大学疼痛生物医学研究所

＜正＞目的:研究脊髓背角网络突触传递的电生理学和神经药理学特性,重点观察抑制性氨基酸（如GABA和甘氨酸）及其离子型受体在脊髓背角网络突触传递中的作用。方法:在新生大鼠（生后10-11d的Sprague-Dawley大鼠）脊髓薄片（L1-S3节段）... 详细信息

＜正＞目的:研究脊髓背角网络突触传递的电生理学和神经药理学特性,重点观察抑制性氨基酸（如GABA和甘氨酸）及其离子型受体在脊髓背角网络突触传递中的作用。方法:在新生大鼠（生后10-11d的Sprague-Dawley大鼠）脊髓薄片（L1-S3节段）冠状切面上,应用平面微电极阵列技术

关键词：平面微电极阵列技术突触网络传递 GABA 甘氨酸脊髓背角 fEPSPs

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针刺研究 2014年第3期 197-197页

本刊2014年第2期刊登沈醉等撰写的文章"不同强度针刺对神经病理性镜像痛大鼠痛阈和脊髓背角磷酸化细胞外信号调节激酶表达的影响",第109页左栏倒数第7行"电针对大鼠手术同侧、对侧脊髓背角p-ERK表达的影响"应更正为"不同强度针刺对大鼠... 详细信息

本刊2014年第2期刊登沈醉等撰写的文章"不同强度针刺对神经病理性镜像痛大鼠痛阈和脊髓背角磷酸化细胞外信号调节激酶表达的影响",第109页左栏倒数第7行"电针对大鼠手术同侧、对侧脊髓背角p-ERK表达的影响"应更正为"不同强度针刺对大鼠手术同侧、对侧脊髓背角p-ERK表达的影响"。向作者及读者致歉!

关键词：脊髓背角同侧对侧磷酸化细胞外信号调节激酶镜像痛大鼠

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独一味对糖尿病痛大鼠脊髓背角内胶质细胞激活的影响

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中成药 2018年第12期40卷 2624-2629页

作者：谢菁聂琼芳吴小兰武汉理工大学湖北武汉430010

目的考察独一味对糖尿病痛大鼠脊髓背角内胶质细胞激活的影响。方法 70只大鼠随机分成正常组、枸橼酸-独一味组、链脲佐菌素-安慰剂组、链脲佐菌素-独一味组(30、224、300、3 000 mg/kg),每组10只。链脲佐菌素枸橼酸缓冲液建立糖尿病痛... 详细信息

目的考察独一味对糖尿病痛大鼠脊髓背角内胶质细胞激活的影响。方法 70只大鼠随机分成正常组、枸橼酸-独一味组、链脲佐菌素-安慰剂组、链脲佐菌素-独一味组(30、224、300、3 000 mg/kg),每组10只。链脲佐菌素枸橼酸缓冲液建立糖尿病痛大鼠模型,机械痛刺激法测定大鼠后足爪痛阈,免疫荧光染色、Western blot法检测大鼠脊髓背角内Iba-1、GFAP、p-STAT3表达水平。结果与链脲佐菌素-安慰剂组比较,链脲佐菌素-独一味组(30、300、3 000 mg/kg)痛阈有所增加,并呈明显的剂量依赖性(P 脊髓背角内胶质细胞激活、降低p-STAT3表达、改善炎症有关。

关键词：独一味糖尿病痛胶质细胞脊髓背角

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延髓缝核SP神经元至脊髓背角的下行投射—HRP逆行追踪与免疫细胞化学结合法研究

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神经解剖学杂志 1988年第2期 178-182,283页

作者：刘贤钊朱家祥张喜京卢金活刘庆莹朱长庚同济医科大学解剖学教研室桂林医学院组织学胚胎学教研室

将HRP分别注入18只大鼠的颈、胸、腰段脊髓背角内,应用HRP逆行追踪与免疫细胞化学结合法,对大鼠延髓缝核至脊髓背角的SP能下行投射进行了观察。至脊髓背角的SP能下行纤维主要来自大缝核(无明显定位关系),其次是隐缝核及苍白缝核。各缝... 详细信息

将HRP分别注入18只大鼠的颈、胸、腰段脊髓背角内,应用HRP逆行追踪与免疫细胞化学结合法,对大鼠延髓缝核至脊髓背角的SP能下行投射进行了观察。至脊髓背角的SP能下行纤维主要来自大缝核(无明显定位关系),其次是隐缝核及苍白缝核。各缝核双标细胞占整个延髓缝核HRP标记细胞总数的百分比分别为:大缝核7.5%,隐缝核2.9%,苍白缝核1.4%。本文还讨论了延髓缝核SP能神经元至脊髓背角下行投射的机能意义。

关键词： P物质脊髓背角缝核免疫细胞化学 HRP

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豆腐果苷对神经病理性疼痛大鼠热痛觉过敏及脊髓背角p-CREB表达的影响

豆腐果苷对神经病理性疼痛大鼠热痛觉过敏及脊髓背角p-CREB表达的...

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作者：谢建琴兰州大学

学位级别：硕士

目的：观察豆腐果苷对坐骨神经慢性压迫伤(the chronic constriction injuryof the sciatic nerve，CCI)后大鼠热痛觉过敏的影响及对脊髓背角磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(p-CREB)表达的影响。方法: 32只180～220g Wistar雄性大鼠... 详细信息

目的：观察豆腐果苷对坐骨神经慢性压迫伤(the chronic constriction injuryof the sciatic nerve，CCI)后大鼠热痛觉过敏的影响及对脊髓背角磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(p-CREB)表达的影响。方法: 32只180～220g Wistar雄性大鼠随机分为4组(n＝8)；分别为Sham组(假手术组)、CCI组(CCI造模组)、H1组(CCI10天后豆腐果苷Helicid，25mg·kg-1·d-1×10d灌胃)和H2组(CCI10天后Helicid，50 mg·kg-1·d-1×10d灌胃)。4组分别于CCI手术前1天、CCI手术后1、3、5、7、9、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20天进行热板实验、测后肢回缩时间(PWL)。CCI后10天每组随机抽取4只大鼠处死；CCI后20天处死其余大鼠，均取L4,5脊髓，免疫组织化学染色，计数p-CREB免疫反应阳性(p-CREB-IR)神经元数量。结果:第一部分：CCI手术后第9天，Sham组、CCI组、H1组、H2组分别与术前PWL基础值比较，Sham组无统计学意义，CCI组、H1组、H2组均有统计学意义(P脊髓背角p-CREB免疫反应阳性神经元细胞计数比较：第一批所取标本，与Sham组比较，CCI组、H1组和H2组计数明显升高，有统计学意义(P脊髓背角神经元细胞p-CREB的表达有关。

关键词：豆腐果苷神经病理性疼痛热痛觉过脊髓背角 p-CREB表达坐骨神经

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脊神经节损伤的实验研究

脊神经节损伤的实验研究

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作者：周跃第三军医大学

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